利用shRNA慢病毒高效敲降雄性小鼠睾丸基因

作     者：龚洁 卜治文 徐晨 叶岚 谢婕 GONG Jie;BU Zhiwen;XU Chen;YE Lan;XIE Jie

作者机构：南京医科大学生殖医学国家重点实验室江苏南京211166 

基　　金：国家自然科学基金项目(31871503 32070843 2022YFC2703501) 

出 版 物：《南京医科大学学报（自然科学版）》 (Journal of Nanjing Medical University(Natural Sciences))

年 卷 期：2023年第43卷第6期

页      码：749-755页

摘      要：目的:建立快速、高效制备小鼠睾丸基因敲降的平台。方法:设计和构建靶向睾丸特异性表达基因Sox30转录本的shRNA表达载体(pSliencer-GFP-shSox30)及其对照质粒(pSliencer-GFP-shScramble),与慢病毒颗粒包装后通过网微注射转导至出生24 d小鼠睾丸生精小管管腔,利用免疫荧光等检测慢病毒敲降鼠体内靶向基因的效率及敲降Sox30后对生殖细胞发育的影响。结果:慢病毒处理敲降后,相比对照组小鼠,shSox30病毒敲降组小鼠睾丸组织中Sox30蛋白表达水平显著下调,生精管腔中圆形精子发育阻滞在2~3步,Ⅶ~Ⅷ期生精管腔中无长型精子。结论:shRNA慢病毒有效降低小鼠睾丸靶基因的表达水平,在制备睾丸特定基因敲降动物模型中具有巨大优势。

主 题 词：RNA干扰 动物模型 Sox30 小鼠 睾丸 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.7655/NYDXBNS20230601

馆 藏 号：203122224...