基于超快速VPCR荧光可视化检测技术的小檗皮及其藏成药中原料药的真伪鉴别研究

作     者：李红颖 宋文俊 李慧林 张继晨 范刚 陈蓉 LI Hong-ying;SONG Wen-jun;LI Hui-lin;ZHANG Ji-chen;FAN Gang;CHEN Rong

作者机构：成都中医药大学药学院四川成都611137 成都中医药大学民族医药学院四川成都611137 四川天府新区新经济发展研究中心四川成都610299 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81874370) 国家自然科学基金资助项目(81973434) 四川省重点研发项目(2022YFS0434) 成都中医药大学“杏林学者”学科人才科研提升计划(QNXZ2018043) 

出 版 物：《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期：2023年第54卷第12期

页      码：3983-3989页

摘      要：目的建立藏药小檗皮BerberisCortex及藏成药中小檗皮特异性DNA的超快速荧光可视化检测方法,实现对小檗皮药材及藏成药中小檗皮的快速鉴别。方法将小檗皮及其混淆品的ITS2序列进行比对,筛选出小檗皮药材特异性DNA序列;针对该序列设计小檗皮特异性引物,建立小檗皮药材以及藏成药中小檗皮特异性DNA的超快速VPCR扩增体系;后将该扩增体系与SYBR Green I荧光染料相结合,实现对扩增产物的荧光可视化检测;同时对该体系的特异性、灵敏度以及在真实样本中的适用性进行考察。结果该体系可以在40min内完成对小檗皮以及藏成药中小檗皮特异性DNA的扩增及荧光可视化检测;检测限低至10pg/μL;对16个批次的小檗皮药材进行分析,其中15个批次的样本产生阳性信号鉴定为小檗皮,与测序结果100%一致,1个批次的样本产生阴性信号,该样本经通用引物测序鉴定为黄柏;对3种含有小檗皮的藏成药进行分析,3个样本均产生阳性信号。结论所建方法缩短了检测时间,并且特异性良好,灵敏度高,可以对小檗皮及其藏成药中小檗皮进行快速、准确的可视化鉴别。

主 题 词：小檗皮 VPCR 快速扩增 可视化检测 藏成药 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.7501/j.issn.0253-2670.2023.12.024

馆 藏 号：203122285...