核桃过敏原成分PCR方法的建立

作     者：吴玉双 杨倩 黄淑迪 陈艳 姬华 WU Yushuang;YANG Qian;HUANG Shudi;CHEN Yan;JI Hua

作者机构：石河子大学食品学院新疆石河子832000 国家食品安全风险评估中心中国医学科学院创新单位(2019RU014号)北京100021 

基　　金：中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2019-I2M-5-024) 

出 版 物：《农产品加工》 (Farm Products Processing)

年 卷 期：2023年第10期

页      码：55-59,66页

摘      要：建立核桃过敏原成分的PCR检测方法,经查阅文献,并根据核桃中主要的过敏原基因Jug r 1设计出3对引物(Jur 1 primer,Jur 2 primer,Jur 3 primer),建立检测核桃过敏原成分的PCR方法并对其进行优化。3对引物可在核桃DNA中扩增出158 bp,145 bp,199 bp的DNA片段,依据引物的Tm值预测引物的最佳退火温度,一般退火温度要比Tm值低5℃,依据预测的退火温度设立温度梯度,进一步确定最佳退火温度;为了检测3对引物是否适用于加工食品,依据各引物的最佳退火温度建立各自的PCR反应条件,配制含不同植物DNA样品的反应体系,分别进行PCR检测;为提高精确度,将核桃DNA梯度稀释,制备出核桃含量为100.00%,10.00%,1.00%,0.10%,0.01%的DNA,分别进行PCR检测。结果表明,3对引物的最佳退火温度分别为50.7,64.0,64.0℃;各引物的特异性良好;3对引物检测的最低含量为0.10%,0.10%,0.01%。建立了一种食品中核桃过敏原的PCR检测方法,该方法特异性良好,精确度高。

主 题 词：核桃过敏原 PCR检测 食品安全 食物过敏 特异性 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

D　O　I：10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2023.05.042

馆 藏 号：203122334...