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青花菜E3泛素连接酶基因的克隆及表达分析

青花菜E3泛素连接酶基因的克隆及表达分析

作     者:裴徐梨 焦鹏 胡文婷 郭品然 荆赞革 唐征 莫丽玲 徐谦 刘院梅 PEI Xuli;JIAO Peng;HU Wenting;GUO Pinran;JING Zange;TANG Zheng;MO Liling;XU Qian;LIU Yuanmei

作者机构:昆明学院农学与生命科学学院云南昆明650214 温州科技职业学院农业与生物技术学院浙南作物育种重点实验室浙江温州325006 

基  金:云南省科技厅基础研究专项青年项目(2019⁃1⁃C⁃25318000002236) 浙江省自然基金项目(LY18C150006) 云南省应用基础研究计划项目(2018FH001⁃044) 浙江省农业(蔬菜)新品种选育重大科技专项(2021C02065⁃4⁃2) 温州市科技项目(2019ZX007⁃2) 浙江省教育厅项目(Y202045786) 

出 版 物:《昆明学院学报》 (Journal of Kunming University)

年 卷 期:2023年第45卷第3期

页      码:93-97页

摘      要:为探讨泛素蛋白酶体在高温胁迫下参与蛋白质降解途径相关的生理过程和功能,以青花菜‘KUQ19⁃27’为试验材料进行高温胁迫(38℃)处理,设计特异性引物从青花菜中克隆得到青花菜E3泛素连接酶基因并进行生物学信息分析,并运用实时荧光定量PCR技术分析其表达特征.结果显示:E3泛素连接酶基因的ORF长度为1332 bp,编码443个氨基酸,相对分子量为48.3 kD.亲疏水性分析结果表明:在多肽链中第207位氨基酸时,亲水性最高,为3.38;在肽链中第280位氨基酸时,疏水性最高,为-4.23,是疏水性蛋白.在青花菜E3泛素连接酶基因氨基酸序列中,其C、Y、S值均小于0.5,由此预测其不具有信号肽,不属于分泌蛋白.系统进化分析表明青花菜E3泛素连接酶基因与其他物种,比如拟南芥、草莓、月季、葡萄等苷核酸序列相似性都在60%以上,同甘蓝、油菜、白菜和拟南芥的进化关系较近,同草莓、月季、菜豆、葡萄、刺菜蓟、芝麻和水桔梗的进化关系较远,与其他物种,如拟南芥、草莓、月季、葡萄等核苷酸序列相似性都在60%以上.荧光定量PCR技术结果表明高温处理3 h时,青花菜E3泛素连接酶基因表达量下调30%,胁迫12 h时表达量持续下降仅为对照的20%.研究结果可为进一步深入探讨青花菜E3泛素连接酶的高温胁迫响应机制提供一定的理论依据.

主 题 词:青花菜 E3泛素连接酶 高温胁迫 表达特征 

学科分类:09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D O I:10.14091/j.cnki.kmxyxb.2023.03.015

馆 藏 号:203122388...

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