基于CRISPR/Cas9技术创建甜菜BvCENH3基因突变体的研究

作     者：韩平安 唐宽刚 常悦 孙瑞芬 王良 张自强 付增娟 赵尚敏 吴新荣 李晓东 HAN Ping′an;TANG Kuan′gang;CHANG Yue;SUN Ruifen;WANG Liang;ZHANG Ziqiang;FU Zengjuan;ZHAO Shangmin;WU Xinrong;LI Xiaodong

作者机构：内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010031 内蒙古自治区甜菜品种遗传改良与种质创制重点实验室内蒙古呼和浩特010031 

基　　金：内蒙古自治区“揭榜挂帅”项目(2022JBGS0029) 国家糖料产业技术体系项目(CARS-170104) 国家自然科学基金项目(31860407) 内蒙古自治区“草原英才”创新人才团队项目(甜菜生物技术产业创新团队) 内蒙古农牧业创新基金项目(2022CXJJN09) 

出 版 物：《北方农业学报》 (Journal of Northern Agriculture)

年 卷 期：2023年第51卷第2期

页      码：1-11页

摘      要：【目的】通过CRISPR/Cas9技术对甜菜BvCENH3基因进行编辑,建立甜菜高效基因组编辑技术体系。【方法】以BvCENH3为编辑目标,设计双靶标构建基因编辑载体,通过农杆菌侵染甜菜叶柄获得转基因植株,利用二代测序技术检测转基因植株突变情况,通过微滴数字PCR技术筛选低拷贝编辑植株。【结果】获得82株甜菜转基因植株,其中40株被成功编辑,编辑效率为48.78%,靶标1效率优于靶标2。突变类型有单碱基替换(T→G、A→C)、碱基缺失(TC、TCTC缺失)等5种。筛选出23株低拷贝编辑植株,BvCENH3插入拷贝数为1.1~1.9。【结论】成功对甜菜BvCENH3进行定点编辑,获得40株BvCENH3基因突变体。初步创建了甜菜基因组编辑技术体系,为甜菜单倍育种奠定了理论与技术基础。

主 题 词：甜菜 BvCENH3 CRISPR/Cas9 基因组编辑 基因突变体 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

D　O　I：10.12190/j.issn.2096-1197.2023.02.01

馆 藏 号：203122407...