含LoxP位点和EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体的构建

作     者：潘华奇 刘磊 曹瑞兵 魏凡华 袁立科 李娟 孙海亮 潘光炎 PAN Hua-qi;LIU Lei;CAO Rui-bing;WEI Fan-hua;YUAN Li-ke;LI Juan;SUN Hai-liang;PAN Guang-yan

作者机构：甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095 宁夏大学农学院动物科学系宁夏银川750021 

出 版 物：《甘肃农业大学学报》 (Journal of Gansu Agricultural University)

年 卷 期：2008年第43卷第2期

页      码：8-12页

摘      要：提取鸭瘟病毒(DPV)疫苗株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据GenBank已发表的DPV UL区UL24、UL23、UL22基因序列,选择保守序列设计了两对引物,分别扩增出位于UL23(TK)两侧的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R),L包括部分UL24、部分TK,R包括部分TK及部分UL22,L和R的拼接片段中TK基因内部缺失468个核苷酸.将L片段和R片段克隆于pBluescript M13-载体上,获得了pSKLR;再将含2个LoxP位点的表达绿色荧光蛋白的基因表达盒插入pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLR-EGEP-LoxP.大量提取pSKLR-EGEP-LoxP质粒,用脂质体转染鸭胚成纤维细胞,24 h后蛋白被正确表达,表明含LoxP位点的表达EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失的重组转移载体被成功构建.

主 题 词：鸭瘟病毒 EGFP Cre/LoxP TK基因 转移载体 

学科分类：090603[090603] 0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1003-4315.2008.02.002

馆 藏 号：203122462...