包装饮用水中铜绿假单胞菌实时荧光定量PCR快速检测

作     者：王芳妹 徐越 林丹 朱秋燕 洪振柏 蒋伟 WANG Fang-mei;XU Yue;LIN Dan;ZHU Qiu-yan;HONG Zhen-bai;JIANG Wei

作者机构：湖南省产商品质量检验研究院湖南长沙410007 湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室湖南长沙410081 

基　　金：湖南省市场监督管理局科技计划项目(编号:2022KJJH49) 

出 版 物：《食品与机械》 (Food and Machinery)

年 卷 期：2023年第39卷第6期

页      码：75-80页

摘      要：目的:有效弥补传统微生物学检验方法的缺陷。方法:针对GB 8538—2022中铜绿假单胞菌的毒力基因pcrL和16S rRNA基因的V3~V4区保守序列设计合成引物和探针,建立实时荧光PCR方法。结果:该方法可以有效扩增常见标准储备菌株的16S rRNA基因,且对铜绿假单胞菌标准储备菌株的毒力基因pcrL的检测效果良好,观察到明显的“S”型扩增曲线,但对常见的食源性致病菌无扩增曲线。当菌液浓度<10 CFU/mL时,pcrL基因仍有扩增曲线,其检测范围为10~10~7 CFU/mL,检测限为10 CFU/mL;不同菌液浓度下毒力基因pcrL的Ct平均值为18.0~38.6。对近3年湖南省14个县、市抽查检验(瓶)桶装水中铜绿假单胞菌不合格样品进行进一步检测,符合率达到100%。结论:该方法对铜绿假单胞菌携带毒力因子pcrL检测的灵敏度较高;且操作简便、特异性强,具有良好的实用性。

主 题 词：铜绿假单胞菌 实时荧光定量PCR 毒力基因 pcrL 16S rRNA 饮用水 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100402[100402] 10[医学] 

D　O　I：10.13652/j.spjx.1003.5788.2023.80078

馆 藏 号：203122543...