PDCoV、PKV和MRV三重荧光定量PCR方法的建立及初步应用

作     者：王利丽 李富强 董明奇 任卫科 路超 张莉 江珊 田向学 鄢明华 WANG Li-li;LI Fu-qiang;DONG Ming-qi;REN Wei-ke;LU Chao;ZHANG Li;JIANG Shan;TIAN Xiang-xue;YAN Ming-hua

作者机构：天津市农业科学院畜牧兽医研究所天津300381 国家动物疫病天津观测实验点天津300381 天津市畜禽分子育种与生物技术重点实验室天津300381 天津市畜禽健康养殖工程技术中心天津300381 哈尔滨国生生物科技股份有限公司黑龙江哈尔滨150028 

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费院级统筹项目:动物疫病数据中心 天津市重大推广项目(ITTPRS2021003) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2023年第53卷第7期

页      码：823-830页

摘      要：为了快速同步检测猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪嵴病毒(PKV)和猪呼肠孤病毒(MRV),参考GenBank中PDCoV M、PKV 5’UTR和MRV L1基因保守序列,设计了特异性引物和探针并优化了反应条件,建立了同时检测PDCoV、PKV和MRV的三重荧光定量PCR方法。该方法可特异性检出PDCoV、PKV和MRV,与PRRSV、CSFV、PCV2、PRV、PEDV、TGEV、RV等病原无交叉反应,3种病毒的最低检测量分别为2.7×10^(1)copies/μL、1.22×10^(1)copies/μL和1.26×10^(2)copies/μL,组内及组间变异系数为0.001~0.019。应用所建立的方法与行业标准及文献报道方法同时检测142份临床样本,结果显示与行业标准及文献报道方法阳性符合率为78%~94.92%。本研究建立的三重荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,为临床PDCoV、PKV和MRV的鉴别诊断和流行病学调查提供了快速敏感的技术手段。

主 题 词：猪德尔塔冠状病毒 猪嵴病毒 猪呼肠孤病毒 三重荧光定量PCR方法 同步检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0109

馆 藏 号：203122604...