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猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型和猪流感病毒四重PCR检测方法的建立

猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型和猪流感病毒四重PCR检测方法的建立

作     者:张宇鑫 吴艳 张伟 田永宽 黄云 曾智勇 吴学祥 王彬 ZHANG Yu-xin;WU Yan;ZHANG Wei;TIAN Yong-kuan;HUANG Yun;ZENG Zhi-yong;WU Xue-xiang;WANG Bin

作者机构:贵州大学动物科学学院贵州贵阳550000 

基  金:贵州省科技计划项目(黔科合支撑1Y033号) 贵州省科技计划项目(黔科合支撑2276号) 

出 版 物:《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期:2023年第44卷第8期

页      码:22-27页

摘      要:为了快速、准确检测4种猪呼吸道病毒,根据NCBI GenBank数据库中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪流感病毒(SIV)的基因序列,设计4对特异性引物,建立一种能通过扩增片段大小来同时鉴别检测PRRSV(111 bp)、PRV(173 bp)、PCV2(273 bp)、SIV(445 bp)的四重PCR检测方法。特异性试验结果显示,扩增PRRSV、PRV、PCV2、SIV模板均能得到预期特异条带,而扩增灭菌水(阴性对照)、CSFV、JEV不产生任何条带。敏感性试验结果显示,该方法最低病毒核酸检出量分别为PRRSV(6.5×10^(4)copies/μL)、SIV(2.68×10^(5)copies/μL)、PCV2(7.16×10~5copies/μL)、PRV(2.37×10^(4)copies/μL)。用所建立的四重和各单一PCR方法检测45份临床样品,四重PCR的阳性检出率分别为PCV2 22.2%(10/45)、PRRSV 17.7%(8/45)、PRV 4.4%(2/45)、PRRSV+PCV2 13.3%(6/45),四重PCR方法与单一PCR方法的阳性符合率为100%。表明建立的病毒四重PCR检测方法特异性强、敏感性高,可用于上述4种呼吸道病毒的鉴别检测。

主 题 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 伪狂犬病病毒 猪圆环病毒2型 猪流感病毒 四重PCR 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1007-5038.2023.08.006

馆 藏 号:203122608...

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