多酶恒温扩增核酸试纸条法快速检测肺炎支原体方法的建立及应用

作     者：胡茜盼 翁兴墉 吕芷贤 蒋婷清 何军 邓仲良 HU Xipan;WENG Xingyong;LÜZhixian;JIANG Tingqing;HE Jun;DENG Zhongliang

作者机构：南华大学衡阳医学院公共卫生学院卫生检验与检疫系湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属南华医院检验科湖南衡阳421001 

基　　金：湖南省教育厅重点项目(21A0261) 湖南省自然科学基金(2022JJ30501) 湖南省卫生健康委员会科研重点课题(20201915) 

出 版 物：《微生物学通报》 (Microbiology China)

年 卷 期：2023年第50卷第7期

页      码：3049-3057页

摘      要：【背景】肺炎支原体是导致儿童和青少年呼吸道感染的重要病原体,长期以来由于其临床表现不特异而容易错过最佳治疗时期。【目的】结合多酶恒温扩增(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)技术和核酸试纸条建立一种快速检测肺炎支原体的方法。【方法】以肺炎支原体社区获得性肺炎呼吸窘迫综合征(community acquired respiratory distress syndrome, CARDS)毒素编码基因为靶基因设计引物和探针,对反应体系的温度、时间等进行优化,评估其敏感性,通过检测肺炎支原体和其余7种病原体分析其特异性,并对35份临床样本进行验证。【结果】MIRA核酸试纸条法在37℃条件下,15 min内便可完成对肺炎支原体的检测,最低检出限为10 copies/μL;除肺炎支原体外,其余7种病原体均不能扩增,特异性较好。以实时荧光PCR检测为标准,MIRA核酸试纸条法对35份临床样本检测后的诊断特异度为100.00%、灵敏度为96.15%、阴性预测值为90.00%、阳性预测值为100.00%。【结论】本研究建立了MIRA核酸试纸条法检测肺炎支原体的方法,具有快速便携、灵敏度高、特异性好等优势,易于在基层推广使用。

主 题 词：多酶恒温扩增技术 核酸试纸条 肺炎支原体 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13344/j.microbiol.china.220928

馆 藏 号：203122622...