猪链球菌二氢硫辛酰胺脱氢酶的原核表达及其粘附相关功能初探

作     者：张静 孙建和 ZHANG Jing;SUN Jian-he

作者机构：上海交通大学农业与生物学院 上海市兽医生物技术重点实验室上海200240 

基　　金：国家自然科学基金(31172381) 家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金(SKLVEB2010KFKT004) 

出 版 物：《上海交通大学学报（农业科学版）》 (Journal of Shanghai Jiaotong University(Agricultural Science))

年 卷 期：2012年第30卷第2期

页      码：34-40页

摘      要：目的:克隆、表达猪链球菌2型菌株ZY05719的膜蛋白二氢硫辛酰胺脱氢酶基因(hm6),分析其重组蛋白的生物学活性。方法:基于GenBank中*** P1/7SSU1634蛋白的基因序列设计引物,克隆ZY05719株的二氢硫辛酰胺脱氢酶基因并进行序列分析;构建pET28a-hm6原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达,重组HM6蛋白即二氢硫辛酰胺脱氢酶用His亲和层析镍柱纯化后,通过SDS蛋白电泳鉴定分析并利用新西兰大白兔制备抗血清,研究其酶活性及其在介导猪链球菌粘附HEp-2细胞中的作用。结果:克隆了1 761bp的二氢硫辛酰胺脱氢酶基因,纯化的70kD重组融合蛋白具有良好的酶活性和免疫原性,且在介导猪链球菌粘附HEp-2细胞中具有作用。结论:成功克隆、表达了ZY05719株的二氢硫辛酰胺脱氢酶基因,初步揭示了其生物学活性,为深入研究二氢硫辛酰胺脱氢酶在猪链球菌致病机制中的作用奠定了基础。

主 题 词：猪链球菌 二氢硫辛酰胺脱氢酶 酶活性 粘附特性 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/J.ISSN.1671-9964.2012.02.007

馆 藏 号：203122645...