NRP-1在调控人舌鳞状细胞癌细胞分化中的作用

作     者：唐子春 王子露 刘来奎 宋晓萌 朱丽芳 叶金海 吴煜农 

作者机构：南京医科大学口腔研究所江苏南京210018 

基　　金：江苏省自然科学基金(编号:BK2010531) 

出 版 物：《口腔医学研究》 (Journal of Oral Science Research)

年 卷 期：2012年第28卷第6期

页      码：601-604页

摘      要：目的:构建神经纤毛素1(Neuropilin-1,NRP-1)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒表达载体,体外评价其对人舌鳞状细胞癌细胞株SCC25(squamous cell carcinoma 25)分化的影响。方法:根据shRNA设计原则,设计合成用于体内干扰NRP-1编码序列的shRNA,重组入慢病毒载体PLKO.1。将构建正确的PL-KO.1/NRP-1-shRNA感染SCC25,western blot和实时荧光定量PCR检测NRP-1的表达,划痕实验和实时荧光定量PCR检测其对SCC25分化的影响。结果:测序证实重组质粒构建成功;体外试验表明,SCC25转染了NRP-1-shRNA后NRP-1表达水平降低,干扰效率达65%。划痕实验结果表明NRP-1下调明显降低了SCC25的迁移能力。实时荧光定量PCR结果表明NRP-1下调可以导致SCC25上皮标记蛋白钙粘附蛋白(epi-thelial cadherin,E-cadherin)表达上调,而间充质标记蛋白纤粘蛋白(fibronectin,FN)和波形蛋白(Vimentin,VIM)表达下调,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:慢病毒介导的NRP-1-shRNA成功在体外抑制了目的基因的表达,并影响SCC25的分化。

主 题 词：短发夹RNA 慢病毒载体 神经纤毛素1 SCC25 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.13701/j.cnki.kqyxyj.2012.06.007

馆 藏 号：203122652...