重组白蛋白结合肽融合人白介素-11的原核可溶表达、纯化、表征及初步活性评价

作     者：孟奂 粟乙梵 王洒 张淑雯 郑永祥 余蓉 张纯 MENG Huan;SU Yi-fan;WANG Sa;ZHANG Shu-wen;ZHENG Yong-xiang;YU Rong;ZHANG Chun

作者机构：四川大学华西药学院靶向药物及释药系统教育部重点实验室成都610041 

基　　金：国家自然科学基金(82003685) 四川省科学技术厅项目(2021YJ0187)资助项目 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2023年第43卷第7期

页      码：44-52页

摘      要：目的:改善重组人白介素-11在原核表达体系中的可溶表达水平以及在体内的循环半衰期。方法:通过构建白蛋白结合肽融合人白介素-11重组蛋白表达载体[pET-30a(+)-ABD-rhIL11],实现融合蛋白在原核表达体系中的可溶表达;基于疏水层析、离子交换层析和凝胶层析建立从破菌上清液中纯化ABD-rhIL-11的方法;通过圆二色光谱及荧光发射光谱分析等鉴定ABD-rhIL-11空间结构,并进行体内外活性及药效学评价。结果:成功获得纯度高于95%的重组融合蛋白,体外结合实验结果表明,ABD-rhIL-11能够迅速与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)结合;细胞增殖实验结果显示,ABD-rhIL-11与对照品活性相当;药代动力学结果显示,融合蛋白能够显著延长白介素-11在大鼠体内的循环半衰期;血小板计数实验结果显示,ABD-rhIL-11能够有效刺激大鼠血小板增殖。结论:为基于白蛋白结合肽融合策略的白介素-11药物长效设计提供了新的思路。

主 题 词：人白介素-11 白蛋白结合肽 可溶表达 血小板增殖 

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13523/j.cb.2212024

馆 藏 号：203122690...