长孢轮枝菌Taq Man-MGB探针实时荧光PCR快速检测方法

作     者：段维军 李雪莲 吕燕 张晓梅 DUAN Weijun;LI Xuelian;LÜYan;ZHANG Xiaomei

作者机构：宁波检验检疫科学技术研究院宁波315012 宁波海关宁波315012 宁波中盛产品检测有限公司宁波315012 西宁市蔬菜技术服务中心西宁810016 

基　　金：国家重点研发计划(2022YFF0608804) 青海省基础研究计划(2022-ZJ-726) 宁波市科研项目(2022S010) 

出 版 物：《植物保护》 (Plant Protection)

年 卷 期：2023年第49卷第4期

页      码：224-232,255页

摘      要：长孢轮枝菌是一种在我国局部地区新近出现且危害性极大的植物病原真菌。根据长孢轮枝菌及其近似种的actin序列差异,设计并合成特异性引物和探针,建立了长孢轮枝菌的实时荧光PCR检测方法。特异性试验结果表明,该检测方法能特异性检测长孢轮枝菌;灵敏度试验结果表明,最低检测限量为10μL反应体系中总DNA含量10 pg;实时荧光PCR优化反应条件为引物终浓度0.8μmol/L,探针终浓度0.8μmol/L,优化后的整个反应过程约1 h。实际样品检测结果表明,该方法可用于疑似受长孢轮枝菌侵染的萝卜样品检测与初筛。此方法快速、灵敏,检测过程完全闭管,无需PCR后续处理,为早期快速检测长孢轮枝菌提供了重要参考。

主 题 词：长孢轮枝菌 实时荧光PCR Taq Man-MGB探针 检测 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

核心收录：

D　O　I：10.16688/j.zwbh.2022332

馆 藏 号：203122692...