20(S)-原人参二醇对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及其机制

作     者：张好 王翠竹 皇甫慧敏 张新威 张一迪 周延民 ZHANG Hao;WANG Cuizhu;HUANGFU Huimin;ZHANG Xinwei;ZHANG Yidi;ZHOU Yanmin

作者机构：吉林大学口腔医院种植科吉林长春130021 吉林大学药学院药物设计学教研室吉林长春130021 

基　　金：国家自然科学基金项目(82071152) 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2023年第49卷第4期

页      码：867-874页

摘      要：目的:探讨20(S)-原人参二醇(PPD)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用,并阐明其成骨诱导机制。方法:采用全骨髓法提取SD大鼠BMSCs,分为对照组和不同剂量(2.5、5.0、10.0、20.0和40.0 mg·L^(-1)) PPD组,采用CCK-8法检测各组BMSCs增殖活性,采用Calcein/PI染色法观察各组BMSCs存活情况,筛选合适浓度PPD用于后续实验。将BMSCs分为对照组和PPD组,于成骨诱导第7天,采用BCIP/NBT比色法进行碱性磷酸酶(ALP)染色并定量检测各组BMSCs中ALP活性;成骨诱导第21天,采用茜素红染色检测各组BMSCs中矿化结节形成情况并定量分析细胞矿化活性;成骨诱导第7天,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组BMSCs中ALP、1型胶原蛋白(COL^(-1))、骨钙素(OCN)和Runt相关转录因子2 (Runx-2) mRNA表达水平,免疫荧光染色法检测各组BMSCs中Runx-2和OCN蛋白表达荧光强度。结果:PPD处理第1和3天,与对照组比较,40.0 mg·L^(-1) PPD组BMSCs增殖活性明显降低(P0.05),20.0和40.0 mg·L^(-1) PPD组BMSCs增殖活性明显降低(P<0.01)。培养第1和3天,5.0、10.0和20.0mg·L^(-1) PPD组活细胞数较多,故选用10.0 mg·L^(-1) PPD用于后续实验。成骨诱导第7天,与对照组比较,PPD组BMSCs的ALP活性明显升高(P<0.01);成骨诱导第21天,与对照组比较,PPD组BMSCs中矿化结节数明显增多,矿化活性明显升高(P<0.01);成骨诱导第7天,与对照组比较,PPD组BMSCs中ALP、 COL^(-1)、 OCN和Runx-2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),Runx-2和OCN蛋白表达荧光强度均明显升高(P<0.01)。结论:PPD可通过增加BMSCs ALP活性和钙盐沉积,上调ALP、COL^(-1)、OCN和Runx-2等成骨基因的表达进而促进BMSCs的成骨分化,PPD是一种有效的成骨诱导活性因子。

主 题 词：20(S)-原人参二醇 成骨 骨髓间充质干细胞 细胞分化 碱性磷酸酶 免疫荧光染色 

学科分类：1008[医学-中药学类] 0710[理学-生物科学类] 1006[医学-中西医结合类] 07[理学] 071009[071009] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.13481/j.1671-587X.20230406

馆 藏 号：203122698...