Bcl-2基因敲除对人胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

作     者：魏莉 张海文 涂芊茜 刘斌 蔡宏剑 孙春亮 陈海涛 Wei Li;Zhang Haiwen;Tu Qianqian;Liu Bin;Cai Hongjian;Sun Chunliang;Chen Haitao

作者机构：解放军第401医院肿瘤科青岛266071 第二军医大学长海医院老年病科 解放军第401医院普外科青岛266071 

出 版 物：《中华胰腺病杂志》 (Chinese Journal of Pancreatology)

年 卷 期：2015年第15卷第4期

页      码：237-241页

摘      要：目的探讨Bcl-2基因对人胰腺癌SW1990细胞增殖及凋亡的影响。方法设计并合成靶向Bcl-2基因的sgRNA（Bcl-2-sgRNA），通过CRISPR—Cas9系统将其结合到CRISPR载体Cas9，经测序验证后转染人胰腺癌细胞株SW1990，筛选Bcl-2基因敲除稳转细胞，以野生型SW1990细胞作为对照。采用CCK-8法测定细胞生长曲线，通过克隆形成实验计数细胞克隆数，运用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果成功获得Bcl-2基因敲除的人胰腺癌SW1990细胞株，其Bcl-2蛋白表达缺失。与野生SW1990细胞比较，敲除Bcl-2基因的SW1990细胞的生长被抑制，细胞克隆形成数量显著减少[（160．7±10．0）个比（285．3±14．2）个]，G．期细胞比例显著增加[（84．51±0．97）％比（57．49±1．08）％]，S期细胞比例显著减少[（12．82±0．99）％比（27．56±1．65）％]，细胞凋亡率显著增加[（12．67±0．59）％比（0．37±0．35）％]，差异均有统计学意义（P值均〈0．01）。结论敲除Bcl-2基因可抑制胰腺癌SW1990细胞的生长，降低细胞克隆形成能力，使细胞阻滞在G1期，并显著增加细胞凋亡率。

主 题 词：胰腺肿瘤 基因 bcl-2 CRISPR—Cas9 细胞增殖 细胞凋亡 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2015.04.005

馆 藏 号：203122799...