ARRDC3在D68型肠道病毒感染A549细胞中的功能研究

作     者：李华怡 傅慧超 司俊卓 杨春 LI Huayi;FU Huichao;SI Junzhuo;YANG Chun

作者机构：重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 

基　　金：重庆市自然科学基金(CSTC2016jcyjA0212) 

出 版 物：《陆军军医大学学报》 (Journal of Army Medical University)

年 卷 期：2023年第45卷第14期

页      码：1539-1546页

摘      要：目的探索含a-Arrestin结构域蛋白3(a-Arrestin-domain-containing-3,ARRDC3)在肠道病毒D组68型(enterovirus D species,EV-D68)感染A549中的表达以及对A549细胞株生物学行为的影响。方法对EV-D68感染宿主细胞前后的样本进行全转录组高通量测序分析,通过生物信息学分析筛选出差异表达基因ARRDC3;RT-qPCR和Western blot验证ARRDC3的表达水平;设计实验分组4组,对照组(未感染EV-D68的A549细胞)、感染组(感染EV-D68的A549细胞)、敲低ARRDC3感染组(感染EV-D68的A549细胞转染ARRDC3-SiRNA-干扰片段)、敲低对照感染组(感染EV-D68的A549细胞转染NC-SiRNA-干扰片段),通过流式细胞术、CCK-8、Transwell实验检测ARRDC3在EV-D68感染模型中对A549细胞周期、增殖、迁移的影响。结果从测序结果中共筛选出差异表达2倍以上的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)239个,其中上调基因135个,下调基因104个,ARRDC3是差异表达基因之一。EV-D68感染A549后,通过RT-qPCR和Western blot结果发现ARRDC3的表达水平显著增加(P<0.05)。细胞周期明显缩短,抑制细胞迁移。进一步通过转染成功干扰ARRDC3表达载体,沉默ARRDC3可以增强EV-D68感染A549细胞,沉默ARRDC3细胞周期DNA合成期延长(P<0.05),虽然对宿主细胞增殖无显著影响,但沉默ARRDC3可引起细胞迁移能力增强(P<0.05)。结论ARRDC3在EV-D68感染A549后表达明显上调,通过阻滞宿主细胞DNA合成期,抑制宿主细胞迁移等作用来发挥对宿主细胞的影响。

主 题 词：ARRDC3 肠道病毒D68型 A549 细胞周期 细胞增殖和迁移 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 100103[100103] 071007[071007] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16016/j.2097-0927.202211078

馆 藏 号：203122912...