广西莪术ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

作     者：林敬祯 甘梓静 谭勇 黄鼎 吴霞 黄晓东 LIN Jing-zhen;GAN Zi-jing;TAN Yong;HUANG Ding;WU Xia;HUANG Xiao-dong

作者机构：广西中医药大学药学院广西南宁530000 

基　　金：广西自然科学基金面上项目(2020GXNSFAA238015) 广西科技重大专项(桂科AA22096029) 广西壮瑶药重点实验室课题(GXZYZZ2019-4) 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2023年第33卷第4期

页      码：422-428,441页

摘      要：[目的]建立和优化广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G·Lee et C·***)的ISSR-PCR反应体系。[方法]通过单因素及正交试验设计研究模板DNA含量、Mg^(2+)浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度对广西莪术ISSR-PCR反应的影响。[结果]25μL广西莪术的ISSR-PCR最佳反应体系为模板DNA用量30 ng,Mg^(2+)2.25 mol/L,dNTPs 2.5 mol/L,引物浓度0.5μmol/L,Taq DNA聚合酶用量1.25 U;利用该体系从100条ISSR引物中进行初筛和复筛,筛选出14条引物。[结论]优化建立的广西莪术ISSR-PCR反应体系稳定可靠,可用于广西莪术遗传多样性分析及种质资源保护研究。

主 题 词：广西莪术 ISSR-PCR体系优化 正交设计 引物筛选 种质资源 

学科分类：1008[医学-中药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.16519/j.cnki.1004-311x.2023.04.0063

馆 藏 号：203123300...