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牛circMYH8的鉴定及其调控牛肌原代细胞增殖的功能探究

牛circMYH8的鉴定及其调控牛肌原代细胞增殖的功能探究

作     者:岳炳霖 杨友抓拉母 冉宏标 王会 蔡欣 王嘉博 柴志欣 彭巍 舒适 付长其 王国文 钟金城 YUE Binglin;YANG Youzhualamu;RAN Hongbiao;WANG Hui;CAI Xin;WANG Jiabo;CHAI Zhixin;PENG Wei;SHU Shi;FU Changqi;WANG Guowen;ZHONG Jincheng

作者机构:西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室四川成都610041 青海大学青海省畜牧兽医科学院青海西宁810016 

基  金:西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目(ZYN2022087) 青海省科技计划项目(2022-NK-110) 国家肉牛牦牛产业技术体系建设项目(CARS-37) 国家自然科学基金(31902153) 四川省科技计划项目(2021YJ0266) 

出 版 物:《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期:2023年第38卷第4期

页      码:197-204页

摘      要:旨在鉴定牛circMYH8以及探究其对牛肌原代细胞增殖的调控作用。设计合成circMYH8的divergent primer及convergent primer 2组引物,分别以牛背最长肌cDNA、RNase R处理的牛背最长肌cDNA以及牛背最长肌gDNA为模板进行PCR扩增,通过测序及琼脂糖凝胶电泳进行环状RNA鉴定;对circMYH8进行不同发育时期骨骼肌RT-qPCR分析、核质分离试验以及RNase R耐受性试验;构建及合成circMYH8的过表达载体及干扰片段,并转染至牛肌原代细胞中,通过RT-qPCR、Western Blot、EdU、流式细胞术等手段探究了circMYH8对牛肌原代细胞增殖表型的影响。结果表明,测序及琼脂糖凝胶电泳证实circMYH8为环状RNA;RT-qPCR分析显示,circMYH8在牛骨骼肌发育早期高表达,核质分离试验结果显示,circMYH8在细胞核和细胞质中都有表达,RNase R耐受性试验表明,circMYH8的稳定性高于其线性转录物;过表达circMYH8抑制了增殖标志基因的表达,EdU活性降低,而抑制circMYH8促进了增殖标志基因的表达,EdU活性上升,S期细胞比例上升。结果表明,牛circMYH8能显著抑制牛肌原代细胞增殖。

主 题 词:牛circMYH8 骨骼肌 细胞增殖 

学科分类:0905[农学-林学类] 09[农学] 

核心收录:

D O I:10.7668/hbnxb.20193739

馆 藏 号:203123315...

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