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鉴别非洲猪瘟病毒基因缺失株与野生株多重qPCR方法的建立

鉴别非洲猪瘟病毒基因缺失株与野生株多重qPCR方法的建立

作     者:卓玛 钱炳旭 薛峰 戴建君 吴晓东 Zhuoma;QIAN Bing-xu;XUE Feng;DAI Jian-jun;WU Xiao-dong

作者机构:南京农业大学动物医学院江苏南京210000 南京农业大学三亚研究所海南三亚572000 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266000 

基  金:国家重点研发计划项目(2021YFD1800500,2020YFA0910200) 海南省科技专项(ZDYF2022XDNY248) 江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(21)2038] 三亚市南京农业大学研究院指导基金项目(NAUSY-ZD08) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2023年第53卷第9期

页      码:1089-1094页

摘      要:为开发一种快速、灵敏的非洲猪瘟病毒(ASFV)野生型株与基因缺失型株的鉴别诊断方法,本研究通过对ASFV p72、CD2v、MGF110-9L基因保守序列设计特异性引物和探针,并对体系进行优化,建立了一种可以同时检测p72、CD2v、MGF110-9L基因的多重q PCR方法。该方法与其他常见猪病毒性病原均无交叉反应,特异性强;敏感性试验结果显示,该方法对p72、CD2v和MGF110-9L重组质粒标准品的最低检出限均为102copies/mL,敏感性好;组内变异系数为0.03%~0.5%,组间变异系数为0.04%~1.5%,表明该方法重复性好。利用本方法和普通qPCR方法分别对50份临床样品进行检测,结果显示,两种检测方法对ASFV核酸的检出率均为70%(35/50),符合率为100%。综上所述,本研究建立的多重qPCR方法为临床鉴别检测ASFV野毒株与基因缺失株提供了重要材料。

主 题 词:非洲猪瘟病毒 基因缺失型株 p72 MGF110-9L CD2v 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0152

馆 藏 号:203123412...

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