山羊支原体山羊肺炎亚种重组酶聚合酶扩增技术的建立

作     者：豆玲 周峰 张莉 王志宇 康文彪 DOU Ling;ZHOU Feng;ZHANG Li;WANG Zhi-yu;KANG Wen-biao

作者机构：甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730046 英科新创(苏州)生物科技有限公司江苏苏州215000 

基　　金：甘肃省农业农村厅科技项目(GNKJ-2021-24) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2023年第44卷第9期

页      码：38-43页

摘      要：为检测山羊传染性胸膜肺炎,选择Mccp-arcA假基因作为靶基因,用Primer 3 plus设计筛选生物素标记的特异引物和荧光素标记的探针,将双标记扩增产物结合到核酸检测试纸条,通过优化反应温度和时间,建立了一种检测山羊支原体山羊肺炎亚种的重组酶聚合酶扩增技术,对其灵敏度、重复性、准确性和特异性进行了试验,并初步用于临床样品的检测。结果显示,山羊传染性胸膜肺炎核酸阳性样品能够在核酸检测试纸条上显示阳性条带,阴性样品无条带。试验具有良好的重复性和敏感性(达到10 copies/μL)。用建立的重组酶聚合酶扩增技术与普通PCR方法同时检测疑似山羊传染性胸膜肺炎8份样品,结果均为3份阳性和5份阴性,符合率100%。该检测方法适用于山羊传染性胸膜肺炎的快速诊断,为Mccp的快速检测提供了新的技术。

主 题 词：重组酶聚合酶扩增方法 试纸条 山羊支原体山羊肺炎亚种 山羊传染性胸膜肺炎 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2023.09.007

馆 藏 号：203123683...