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猪δ冠状病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

猪δ冠状病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者:孙彦婷 康宇 路亚男 井汇源 董望 李向辉 王金合 唐光武 SUN Yanting;KANG Yv;LU Yanan;JING Huiyuan;DONG Wang;LI Xianghui;WANG Jinhe;TANG Guangwu

作者机构:河南牧业经济学院河南郑州450046 

基  金:河南省重点研发与推广专项项目(202102110247) 河南省教育厅高等学校重点科研计划项目(16A230007) 河南牧业经济学院博士启动基金项目(53000212) 河南牧业经济学院预防兽医学重点学科建设项目(MXK2016102) 

出 版 物:《现代牧业》 (Modern Animal Husbandry)

年 卷 期:2023年第7卷第3期

页      码:12-17页

摘      要:建立一种快速检测猪δ冠状病毒(PDCoV)的方法。根据GeneBank收录的PDCoV M基因序列,设计两对特异性引物和TaqMan探针,对PDCoV TaqMan荧光定量RT-PCR反应条件进行优化。Ct值与质粒模板之间呈现良好的线性关系,标准方程为y=-3.6421x+34.194,相关系数R 2=0.9992。荧光定量RT-PCR方法仅对PDCoV呈现特异性扩增,无交叉反应。敏感度试验结果显示,最低检出量为1.25×10^(1)copies/μL,灵敏度高。重复性试验结果显示,批内和批间测定均具有良好的重复性。TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法是一种可靠的快速检测PDCoV的方法。

主 题 词:猪δ冠状病毒 M基因 荧光定量RT-PCR TaqMan 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1008-3111.2023.03.004

馆 藏 号:203123993...

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