实时定量RT-PCR方法检测太平洋牡蛎中的诺沃克样病毒

作     者：岳志芹 汪俊 梁成珠 雷质文 高宏伟 徐彪 朱来华 薛长湖 YUE Zhi-qin;WANG Jun;LIANG Cheng-zhu;LEI Zhi-wen;GAO Hong-wei;XU Biao;ZHU Lai-hua;XUE Chang-hu

作者机构：山东出入境检验检疫局技术中心山东青岛266002 中国海洋大学食品安全实验室山东青岛266003 

基　　金：山东出入境检验检疫局科研基金项目(sk38-2004) 宁波市博士科学基金 新世纪人才基金资助项目 

出 版 物：《海洋科学》 (Marine Sciences)

年 卷 期：2008年第32卷第8期

页      码：1-4页

摘      要：建立了Taqman实时定量RT-PCR方法检测诺沃克样病毒(Norwalk-like Virus,NLV)的方法,并对中国的牡蛎样品进行了分析。选取GⅡ型NLV的RNA聚合酶区域,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,建立了定量RT-PCR反应体系。将含有NLV扩增片段的质粒10倍梯度稀释,作为标准品进行反应以确定检测灵敏度并制备标准曲线。结果表明,质粒密度在6×106,6×105,6×104,6×103,6×102,6×101,6个拷贝之间,共7个数量级的范围内,定量RT-PCR反应都有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为6个拷贝。制备的标准曲线中,病毒拷贝数(X)与Ct值的关系为Ct=-3.36lgX+37.11,相关系数R2=0.998。对中国37批太平洋牡蛎(Crassostrea gigas Thunberg)样品进行了定量检测,有6批样品为阳性,并根据标准曲线测定了NLV的含量。

主 题 词：牡蛎 诺沃克样病毒(Norwalk-like virus, NLV) 实时定量RT-PCR Taqman探针 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 071005[071005] 10[医学] 

核心收录：

馆 藏 号：203124004...