牛星状病毒和牛病毒性腹泻病毒及牛传染性鼻气管炎病毒三重荧光PCR方法的建立与应用

作     者：赵亮 温肖会 翟颀 李家奎 贾春玲 周秀蓉 王焕硕 吕殿红 罗胜军 ZHAO Liang;WEN Xiao-hui;ZHAI Qi;LI Jia-kui;JIA Chun-ling;ZHOU Xiu-rong;WANG Huan-shuo;LüDian-hong;LUO Sheng-jun

作者机构：广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站/岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心广东广州510640 西藏农牧学院动物科学学院西藏林芝860000 华中农业大学动物科技学院/动物医学院湖北武汉430070 

基　　金：国家现代农业产业技术体系项目(CARS-37) 广东省动物疫病野外科学观测研究站项目(2021B1212050021) 广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金资助项目(2023KJ119) 牦牛重要疫病防控技术研究-牦牛主要传染病快速检测及防控技术研究项目(XZ202101ZD0002N) 广东省种畜禽种质资源疫病防控项目 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2023年第53卷第10期

页      码：1242-1248页

摘      要：为快速同时检测牛星状病毒(BAstV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),本研究针对BAstV基因组ORF1a基因、BVDV基因组多聚蛋白基因和IBRV基因组g B基因的保守区域各设计特异性引物和探针,经反应体系和扩增程序优化,建立了BAstV、BVDV和IBRV三重荧光PCR检测方法,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,并应用该方法对临床样品进行检测。结果显示,该方法可扩增BAstV、BVDV和IBRV的核酸,不能对多杀性巴氏杆菌(Pm)、B型牛鼻炎病毒(BRBV)、口蹄疫病毒(FMDV)等病原的核酸进行扩增,特异性较强;对BAstV、BVDV和IBRV的最低检测限(LOD)均为305copies/μL,敏感性较高;检测BAstV、BVDV和IBRV的组内、组间重复性试验变异系数(CV)值均小于3%,重复性较好。应用该方法检测100份临床样品,BAstV、BVDV、IBRV的阳性检出率分别为0、11%、6%。本研究建立的三重荧光PCR方法具有敏感性高、特异性强、在同一反应体系中可以快速鉴别检测BAstV、BVDV、IBRV等优点,可应用于临床BAstV、BVDV、IBRV感染的检测。

主 题 词：牛星状病毒 牛病毒性腹泻病毒 牛传染性鼻气管炎病毒 三重荧光PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0175

馆 藏 号：203124140...