位点特异DNA甲基化调控细胞周期素D1基因

作     者：杨刚 孟晨雪 田洁 尚雨寒 张品正 孙佳佳 王旭莹 常铭杰 马雨凯 郭志义 YANG Gang;MENG Chen-Xue;TIAN Jie;SHANG Yu-Han;ZHANG Pin-Zheng;SUN Jia-Jia;WANG Xu-Ying;CHANG Ming-Jie;MA Yu-Kai;GUO Zhi-Yi

作者机构：华北理工大学公共卫生学院医学实验技术系唐山市核酸遗传信息研究重点实验室河北唐山063000 

基　　金：国家自然科学基金(No.31050010) 教育部归国留学基金(No.No.311) 华北理工大学公共卫生学院高水平科研创新团队建设计划(No.KYTD202312)资助 

出 版 物：《中国生物化学与分子生物学报》 (Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology)

年 卷 期：2023年第39卷第10期

页      码：1445-1452页

摘      要：DNA甲基化是基因表达调控的重要方式,一般被认为以CpG岛形式发挥作用;近年的研究表明,位点特异的DNA甲基化以元件(cis-regulatory element)的形式在生物微进化以及基因精细调控中发挥重要作用。我们的研究结果显示,曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)导致细胞周期蛋白D1基因表达下调,以及其核心启动子的+65到+77之间的两段串联CpG序列发生DNA甲基化。报告基因结果显示,由细胞周期素D1核心启动子片段驱动的报告基因活性在TSA处理后下降到原来0.12,而前段(A)突变与后段(B)突变时,报告基因活性分别下降到原来1/7.6与1/8.36,双突变则下降到原来1/7.51。对于CMV启动子嵌合15 bp片段驱动的报告基因活性,野生型、A、B与AB双突变型报告基因活性分别下降1/1.48、1/1.17、1/1.51以及1/1.21。体外甲基化研究结果显示,与对照组相比,***Ⅰ处理组的启动子活性中,野生型活性下降到原来1/8800,A突变型活性下降到原来1/2700,B突变型活性下降到原来1/4156,双突变型活性下降到原来1/6222。应用***Ⅰ处理进一步区分甲基化位点,A和B突变型报告基因活性分别下降到原来1/1.11和1/1.40。有趣的是,比对发现劳亚兽总目的+66位点为T。由此,我们联合应用DNA定点突变与体外DNA甲基化模拟技术,研究了细胞周期蛋白D1基因位点DNA甲基化元件的作用。我们的研究表明,细胞周期蛋白D1基因核心启动子的+65位点的甲基化在转录调控过程中可能发挥关键作用,为位点特异甲基化在基因精细调控的机制研究提供实验数据。

主 题 词：DNA位点特异性甲基化 转录调控 细胞周期素D1基因 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 07[理学] 1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.13865/j.cnki.cjbmb.2023.07.1101

馆 藏 号：203124148...