苜蓿矮化病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立

作     者：党开祥 万超越 王思越 李克梅 托伦巴特·毕亚洪 DANG Kai-xiang;WAN Chao-yue;WANG Si-yue;LI Ke-mei;Tuolunbate Biyahong

作者机构：新疆农业大学农学院/农业农村部西北荒漠绿洲农林外来入侵生物防控重点实验室(部省共建)/农林有害生物监测与安全防控重点实验室乌鲁木齐830052 新疆塔城地区塔城市二工镇农业(畜牧业)发展中心塔城834300 

基　　金：国家重点研发计划课题(2022YFD1401101) 国家自然科学基金项目(31760708) 

出 版 物：《新疆农业大学学报》 (Journal of Xinjiang Agricultural University)

年 卷 期：2023年第46卷第3期

页      码：234-239页

摘      要：为灵敏、快速检测紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中的苜蓿矮化病毒(ADV),根据该病毒L蛋白保守序列设计特异性引物,建立基于SYBR GreenⅠ染料的实时荧光定量PCR检测体系,并应用该方法对田间样品和种子进行快速检测。结果表明,建立的RT-qPCR检测技术可对苜蓿中的苜蓿矮化病毒含量进行精确检测,最低检测浓度为9.8×10^(2)copies/μL,灵敏度约是常规PCR的100倍。通过对101份苜蓿样品的检测验证,该方法阳性检出率为61%,较常规PCR高6%。挑选的10份苜蓿种子中有3份被检测出携带苜蓿矮化病毒,病毒含量范围为0~3.02×10^(6)copies/μL。表明建立的RT-qPCR检测体系特异性强、灵敏度高,可应用于苜蓿矮化病毒的定量检测。

主 题 词：紫花苜蓿 苜蓿矮化病毒 实时荧光定量PCR 检测体系 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D　O　I：10.20088/j.cnki.jxau.2023.03.010

馆 藏 号：203124224...