基于CRISPR-Cas12a与G-四链体构建免标记电化学生物传感器检测microRNA

作     者：史铠 陈稼轩 李琼 杨孝容 成英 宋九华 孙国峰 SHI Kai;CHEN Jiaxuan;LI Qiong;YANG Xiaorong;CHENG Ying;SONG Jiuhua;SUN Guofeng

作者机构：乐山师范学院新能源材料与化学学院乐山614000 

基　　金：四川省科技计划资助(2022JDRC0126) 乐山师范学院引进人才启动项目(RC2022002) 乐山市2021年重点科技项目(21SZD153)资助 

出 版 物：《分析试验室》 (Chinese Journal of Analysis Laboratory)

年 卷 期：2023年第42卷第11期

页      码：1476-1482页

摘      要：CRISPR-Cas12a是一种功能强大且可编程的分子诊断技术。本文基于CRISPR-Cas12a的附属切割活性与G-四链体/氯化血红素(Hemin)复合物,设计了一个免标记电化学生物传感器,实现对miRNA的强特异性检测。靶标miRNA-21与双链DNA探针上的Toehold区域结合并发生链置换反应,置换出双链DNA探针中较短的DNA。置换下来的DNA可以有效地激活CRISPR-Cas12a的附属切割活性。随后,具有附属切割活性的Cas12a切割电极表面上形成G-四链体/Hemin的DNA序列,导致电流信号减弱。在最优条件下,电流信号强度变化与10~100 pmol/L范围内的miRNA-21浓度呈良好的线性关系,检出限为4.2 pmol/L。该电化学生物传感器能够实现对单个碱基突变的miRNA-21或其它miRNA序列特异性识别,并可用于人血清样本(10%)中miRNA-21的检测。

主 题 词：CRISPR-Cas12a G-四链体 免标记 电化学生物传感器 microRNA 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 070302[070302] 0805[工学-能源动力学] 0703[理学-化学类] 0836[0836] 

核心收录：

D　O　I：10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2022.090204

馆 藏 号：203124336...