Ⅰ型牛疱疹病毒VP22蛋白原核表达及多克隆抗体制备

作     者：郭伟强 段绪来 解佳 赵学亮 刘英楠 陈鸿军 GUO Wei-qiang;DUAN Xu-lai;XIE Jia;ZHAO Xue-liang;LIU Ying-nan;CHEN Hong-jun

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 西北农林科技大学动物医学院陕西杨陵712100 

基　　金：国家自然科学基金项目(32170161) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2023年第44卷第11期

页      码：20-25页

摘      要：为制备Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)VP22蛋白抗体,选用国内分离株BHV-SHJS,在其UL49基因核酸序列第517至747位间设计引物扩增目的片段,构建pET-28a-UL49(172-249 aa)原核表达载体,转化载体至BL21(DE3)感受态细胞;经IPTG诱导表达并纯化VP22(172-249 aa)融合蛋白后;用该融合蛋白作抗原,以皮下注射的方式免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体;经间接ELISA、Western blot及间接免疫荧光(IFA)方法检测其灵敏度和特异性。结果表明,表达的VP22蛋白以包涵体形式存在;ELISA测定结果显示,制备的VP22蛋白抗体效价达到1∶16000;Western blot和IFA结果显示,制备的多克隆抗体能与BHV-SHJS VP22特异性结合,具有良好的反应原性。试验结果为后期BHV-1感染宿主细胞在机制方面的研究和VP22功能的探究奠定了基础。

主 题 词：Ⅰ型牛疱疹病毒 VP22蛋白表达 多克隆抗体制备 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2023.11.005

馆 藏 号：203124348...