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基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病发病菌量

基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病发病菌量

作     者:李凤巍 裴悦宏 张晓枫 王智 陈海涛 徐宸 冉茂 孙现超 LI Fengwei;PEI Yuehong;ZHANG Xiaofeng;WANG Zhi;CHEN Haitao;XU Chen;RAN Mao;SUN Xianchao

作者机构:西南大学植物保护学院重庆400715 中国烟草总公司重庆市公司烟叶分公司重庆400020 中国烟草总公司重庆市公司石柱分公司重庆409100 

基  金:国家自然科学基金项目(31870147) 中国烟草总公司重庆市公司科技项目(B20212NY2312,B20221NY1307,B20211-NY1315) 广西中烟工业有限责任公司项目(2021450000340029) 

出 版 物:《西南大学学报(自然科学版)》 (Journal of Southwest University(Natural Science Edition))

年 卷 期:2023年第45卷第11期

页      码:96-105页

摘      要:本研究根据烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)与烟草赤星病菌(Alternaria alternata)、烟草棒孢霉叶斑病菌(Corynespora cassiicola)等田间常见烟草叶部病害病原菌的rDNA-ITS(ribosomal DNA Internal Transcribed Spacers,rDNA-ITS)序列差异位点,设计一对特异性检测引物RSW1F/RSW2R,建立烟草靶斑病菌实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR)快速准确检测体系,并分析烟草靶斑病最低发病菌量.结果表明,设计的引物特异性良好,灵敏度达到1×10^(-3) ng/μL.利用已获得的实时荧光定量PCR体系计算得出引起烟草靶斑病发病的最低菌量为12.03 pg/μL.此外,对重庆龚滩地区烟叶中烟草靶斑病菌含量进行计算,发现土壤以及周边杂草可能为该地区烟草靶斑病菌的侵染来源,并进一步确定该地区预防烟草靶斑病的最佳时期为5月15日至6月15日,为烟草靶斑病菌的田间预警预报及流行提供理论依据.

主 题 词:烟草 烟草靶斑病 实时荧光定量PCR 

学科分类:09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

D O I:10.13718/j.cnki.xdzk.2023.11.010

馆 藏 号:203124356...

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