斑马鱼chac1基因的表达特征及其在髓系造血中的功能研究

作     者：陈紫涵 周静 王德成 晏博 CHEN Zi-han;ZHOU Jing;WANG De-cheng;YAN Bo

作者机构：三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室三峡大学感染与炎症损伤研究所三峡大学基础医学院湖北宜昌443002 上海市(复旦附属)公共卫生临床中心结核病研究中心上海201508 

基　　金：上海市“科技创新行动计划”医学创新研究领域项目(22Y11920500) 

出 版 物：《淡水渔业》 (Freshwater Fisheries)

年 卷 期：2023年第53卷第6期

页      码：3-12页

摘      要：为探索chac1基因(ChaC glutathione specific gamma-glutamylcyclotransferase 1)在早期胚胎发育中的功能,本研究以斑马鱼(Danio rerio)为研究对象首先分析了斑马鱼Chac1蛋白的序列特征并用qRT-PCR检测了chac1在斑马鱼胚胎不同发育阶段和成鱼不同组织中的表达模式,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术在chac1基因的三个外显子上设计了3条sgRNA并通过测序及qRT-PCR检测其敲除效率。苏丹黑染色3 dpf(days post fertilization)野生型和chac1突变型斑马鱼幼鱼的中性粒细胞数量;qRT-PCR检测突变斑马鱼髓系造血相关因子。结果显示:chac1是母源基因,在受精后0~3 hpf(hours post fertilization)时其表达量较高,之后随着母本基因的影响逐渐变小,chac1的mRNA表达量下降;在斑马鱼成鱼中,其在肌肉、卵巢、脑中高表达;此外,突变型斑马鱼较野生型斑马鱼相比,其苏丹黑染色阳性信号更多;chac1突变后髓系造血转录调控因子pu.1的mRNA水平上调。综上,chac1为母源基因,其缺失会促进早期中性粒细胞的发育并伴随着髓系造血转录调控因子pu.1的上调。

主 题 词：chac1 斑马鱼(Danio rerio) 髓系造血 中性粒细胞 表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-6907.2023.06.001

馆 藏 号：203124375...