灰毡毛忍冬UGTPg17、UGTPg36基因克隆及功能研究

作     者：杨敏 龙雨青 曾娟 曾梅 周新茹 王玲 付学森 周日宝 刘湘丹 YANG Min;LONG Yu-qing;ZENG Juan;ZENG Mei;ZHOU Xin-ru;WANG Ling;FU Xue-sen;ZHOU Ri-bao;LIU Xiang-dan

作者机构：湖南中医药大学药学院长沙410208 湘产大宗道地药材种质资源及规范化种植重点研究室长沙410208 湖南省普通高等学校中药现代化研究重点实验室长沙410208 

基　　金：国家现代农业产业技术体系(CARS-21) 湖南省自然科学基金(2021JJ30497,2021JJ30515) 2022湖南省中医药科研计划项目(D2022134) 2021湖南省教育厅科学研究项目(21C0245) 2020年湖南省一流专业建设点:中药资源与开发,湖南中医药大学中药学一流学科项目(校行科字【2018】3号) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2023年第39卷第10期

页      码：256-267页

摘      要：克隆灰毡毛忍冬糖基转移酶UGTPg17、UGTPg36基因,并进行其不同花期表达量与皂苷含量相关性分析。根据灰毡毛忍冬转录组Unigene序列设计特异性引物进行UGTPg17、UGTPg36克隆;使用生物信息学网站对克隆的UGTPg17、UGTPg36编码蛋白进行理化性质、蛋白结构和进化关系等分析;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析基因在不同花期表达情况;HPLC法测定灰毡毛忍冬皂苷含量;利用SPSS分析基因表达量与皂苷含量相关性。UGTPg17、UGTPg36基因开放阅读框长度分别为1410 bp、1428 bp,分别编码469、475个氨基酸,分别包含4、7个糖基化位点,均属于不稳定、亲水性蛋白,不具跨膜区域;UGTPg36蛋白不存在信号肽序列,UGTPg17蛋白平均S值>0.5,推测其可能含有信号肽。UGTPg17、UGTPg36在不同花期中表达均为上升趋势,皂苷含量在不同花期中存在波动,两者相关性分析得出,2个UGT基因与皂苷含量呈极显著负相关。成功从灰毡毛忍冬中克隆了UGTPg17、UGTPg36基因,其在不同花期表达存在差异性,且相关性分析表明UGTPg17、UGTPg36基因与灰毡毛忍冬皂苷生物合成相关,为进一步探索其具体功能奠定了基础。

主 题 词：灰毡毛忍冬 糖基转移酶 基因克隆 生物信息学 表达分析 皂苷含量 

学科分类：1008[医学-中药学类] 0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2023-0194

馆 藏 号：203124500...