利用CRISPR/Cas9技术靶向KRAS或TP53突变抑制SW620细胞的增殖

作     者：刘瑞琦 王洁 雷超 刘一睿 王雅婷 张竞方 LIU Rui-qi;WANG Jie;LEI Chao;LIU Yi-rui;WANG Ya-ting;ZHANG Jing-fang

作者机构：北京中医药大学生命科学学院北京100029 

基　　金：国家自然科学青年基金项目(31701280) 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2023年第23卷第21期

页      码：4001-4006页

摘      要：目的:运用CRISPR/Cas9基因编辑工具研究靶向SW620细胞系中KRAS或TP53突变对细胞增殖活性的影响。方法:针对SW620细胞中KRAS和TP53的突变位点设计sgRNA,并利用TIDE法检测sgRNA的切割效率。通过细胞增殖实验检测靶向KRAS或TP53突变后SW620细胞增殖活性的改变,并应用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平的变化。结果:分别构建了靶向SW620细胞系中KRAS和TP53突变的sgRNA质粒,并通过TIDE分析验证了sgRNA的内源切割效率;细胞增殖实验及细胞凋亡检测显示,靶向突变的KRAS或TP53基因后,SW620细胞增殖活性明显减弱,凋亡水平明显升高(P<0.05)。结论:本研究基于CRISPR/Cas9技术实现了对SW620细胞系中突变的KRAS和TP53的基因编辑,发现靶向KRAS或TP53突变能够明显抑制SW620细胞的增殖活性并促进细胞凋亡,为结直肠癌相关靶点治疗提供了体外实验依据。

主 题 词：CRISPR/Cas9 结直肠癌 KRAS TP53 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 100214[100214] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

D　O　I：10.13241/j.cnki.pmb.2023.21.001

馆 藏 号：203124526...