细粒棘球绦虫EgG1Y162新型多表位疫苗的设计及其免疫特性研究

作     者：张涛 郭久鹏 魏来 热甫克提·艾尼瓦尔 努尔阿米乃姆·库杜斯 于明凯 李玉娇 ZHANG Tao;GUO Jiupeng;WEI Lai;REFUKETI·ainiwaer;NUERAMINAIMU Kudusi;YU Mingkai;LI Yujiao

作者机构：新疆医科大学第一临床学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院 新疆医科大学第一附属医院 

基　　金：国家自然科学基金项目(32160182) 新疆维吾尔自治区科学技术厅杰出青年项目(2022D01E69),新疆医科大学大学生创新训练计划项目(CX2021009) 新疆医科大学第一附属医院优秀青年人才培养专项 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2023年第18卷第12期

页      码：1424-1429,1433页

摘      要：目的应用软件和在线网络分析EgG1Y162的氨基酸序列,了解其理化性质及二、三级结构特点;预测该抗原的T、B细胞表位,筛选优势表位并将其与热休克蛋白HSP70进行联合重组表达,验证该新型多表位疫苗刺激机体产生的免疫反应。方法通过NCBI检索获取EgG1Y162和HSP70的氨基酸序列,利用Protparam、NetPhos、TMHMM-2.0等在线程序分析EgG1Y162蛋白的分子质量、等电点、氨基酸组成、跨膜结构域、磷酸化位点,预测其二、三级结构及T、B细胞表位。结合预测结果优化确定最终的表位信息,将优化的优势表位信息与HSP70分子对接,构建重组HSP70-EgG1Y162,通过酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测对比分析HSP70蛋白、EgG1Y162和HSP70-EgG1Y162诱导产生的免疫反应强度。结果预测EgG1Y162蛋白由120 aa组成,HSP70由762 aa组成。在线分析EgG1Y162蛋白的二级结构中α-螺旋约占22.50%,延长链约占28.33%,β-转角约占6.67%,无规则卷曲约占42.50%。筛选EgG1Y162抗原的优势T、B细胞表位,然后以HSP70蛋白为载体与EgG1Y162抗原T-B细胞联合表位及连接蛋白Linker-GGGS构建HSP70-EgG1Y162多表位疫苗,免疫小鼠后取脾细胞进行ELISPOT检测,反应斑点的灰度值较对照组显著增高,即HSP70-EgG1Y162具有免疫原性。结论生物信息学方法分析预测细粒棘球绦虫EgG1Y162蛋白含有丰富的T、B细胞表位,筛选的优势表位与热休克蛋白HSP70融合后能够增强该新型包虫多表位抗原的免疫原性,ELISPOT证实以HSP70蛋白和EgG1Y162构建的HSP70-EgG1Y162多表位疫苗免疫原性增强,该设计方法有望成为设计优势疫苗的一种新方法,为包虫病的预防提供新思路。

主 题 词：EgG1Y162 T细胞表位 B细胞表位 分子对接 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13350/j.cjpb.231211

馆 藏 号：203125113...