嗜果刀孢菌寄主范围的测定及PCR快速检测

作     者：陈帅康 王彩霞 施万斌 鲁海龙 董安昊 刘楚丽 马荣 CHEN Shuai-kang;WANG Cai-xia;SHI Wan-bin;LU Hai-long;DONG An-hao;LIU Chu-li;MA Rong

作者机构：新疆农业大学林学与风景园林学院新疆乌鲁木齐830052 

基　　金：第三次新疆综合科学考察专项“伊犁河谷微生物资源多样性调查及资源潜力评估”(2021xjkk05005-3) 新疆维吾尔自治区杰出自然科学基金:天山野果林野杏穿孔病的发生规律及成灾关键因子研究(2022D01E47) 

出 版 物：《林业科学研究》 (Forest Research)

年 卷 期：2023年第36卷第6期

页      码：162-171页

摘      要：[目的]探讨嗜果刀孢菌对新疆其他主要树种的潜在危害,提高该病害的诊断和检测效率。[方法]本文将嗜果刀孢菌通过离体叶片接种至6科19种植物的健康叶片上,初步测定其致病性和寄主范围;参考tef1序列设计了嗜果刀孢菌的特异性引物;通过常规PCR和实时荧光PCR对76株嗜果刀孢菌和22株其它真菌进行特异性和灵敏度检测,并优化实时荧光PCR的反应体系;另外,应用所设计的特异性引物对田间自然发病样本和人工接种7、10、13、16、19、21、24、48 h后的野杏叶片样品进行常规PCR检测。[结果]15种植物叶片在接种嗜果刀孢菌5 d后出现明显病斑,不同寄主的病斑大小存在极显著性差异(P<0.01),其中新疆小叶白蜡的病斑面积最大,达28.99 mm^(2),而紫叶矮樱、黄果山楂、新疆杨、鞑靼桑等4种植物叶片未发病。本研究设计的特异性引物W0404-14-F/W0404-14-R扩增出的特异性条带为113 bp,对照及其它真菌无扩增条带。常规PCR检测的灵敏度为5.99×10^(-1)ng·μL^(-1)。在野杏叶片接种10 h后通过常规PCR可在叶片内检测到嗜果刀孢菌。[结论]嗜果刀孢菌可为害15种其他树种,具有潜在危害性;PCR快速检测方法检测嗜果刀孢菌速度快、特异性强,本研究首次探索了嗜果刀孢菌潜在寄主范围及PCR快速检测方法,为由嗜果刀孢菌引起的穿孔病的诊断及检测提供了理论依据。

主 题 词：穿孔病 嗜果刀孢菌 寄主范围测定 实时荧光PCR 特异性引物 灵敏度 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

核心收录：

D　O　I：10.12403/j.1001-1498.20230029

馆 藏 号：203125226...