猪圆环病毒3型和4型TaqMan双重实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：殷冬冬 王洁茹 尹磊 沈学怀 戴银 赵瑞宏 侯宏艳 胡晓苗 王桂军 潘孝成 YIN Dongdong;WANG Jieru;YIN Lei;SHEN Xuehuai;DAI Yin;ZHAO Ruihong;HOU Hongyan;HU Xiaomiao;WANG Guijun;PAN Xiaocheng

作者机构：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所安徽省畜禽疫病研究中心合肥230001 畜禽产品安全工程安徽省重点实验室合肥230001 安徽农业大学动物科技学院合肥230036 

基　　金：安徽省重点研究与开发计划(202204c06020009) 安徽省现代农业产业技术体系(AHCYJXTX-05-13)共同资助 

出 版 物：《安徽农业大学学报》 (Journal of Anhui Agricultural University)

年 卷 期：2023年第50卷第6期

页      码：979-984页

摘      要：为了建立一种快速检测猪圆环病毒3型(PCV3)和4型(PCV4)的TaqMan双重实时荧光定量PCR检测方法,根据Gen Bank已登录的PCV3和PCV4基因保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,经优化各反应条件,构建标准曲线,分析其敏感性、特异性和重复性,并利用建立的荧光定量PCR方法对采自安徽省的临床样品进行检测,与普通PCR方法进行一致性评价。结果显示,PCV3的标准曲线为Y=–3.534 6 logX+41.11(R^(2)=1.00),PCV4的标准曲线为Y=–3.382 5 logX+40.67(R^(2)=1.00)。PCV3和PCV4的检测限分别为49.5和27.1 copies·μL^(-1)。对猪圆环病毒1型(PCV1)和2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV)及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)无特异性扩增,组内和组间变异系数均<1%。临床样品检测结果显示,PCV3阳性检出率为40.8%,PCV4阳性检出率为20.4%,混合感染率为19.0%。建立了灵敏、特异,可同时快速、准确鉴别PCV3和PCV4的TaqMan双重实时荧光定量PCR检测方法,为PCV3和PCV4的检测和监测提供技术支撑。

主 题 词：猪圆环病毒3型 猪圆环病毒4型 TaqMan 实时荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13610/j.cnki.1672-352x.20231219.001

馆 藏 号：203125317...