食品中致泻大肠埃希氏菌多重实时荧光PCR检测方法的建立与验证

作     者：魏咏新 张西萌 李二鹏 马丹 汪琦 赵晓娟 李丹 魏海燕 WEI Yong-Xin;ZHANG Xi-Meng;LI Er-Peng;MA Dan;WANG Qi;ZHAO Xiao-Juan;LI Dan;WEI Hai-Yan

作者机构：中国海关科学技术研究中心北京100026 拉萨海关技术中心拉萨850000 

基　　金：海关总署科研项目(2021HK215) 中国认证认可协会科技计划项目(2022CCAAKY13) 

出 版 物：《中国口岸科学技术》 (China Port Science and Technology)

年 卷 期：2023年第5卷第S2期

页      码：89-100页

摘      要：本研究建立了食品中致泻大肠埃希氏菌的多重实时荧光PCR定性检测方法,通过检测多种类人工污染样品进行方法验证。设计并筛选致泻大肠埃希氏菌14个目标基因的引物和探针,确定多重实时荧光PCR反应条件,同时用PCR和多重实时荧光PCR方法检测208株菌的14个目标基因,对不同浓度的阳性样本进行多重实时荧光PCR重复性检测,对结果进行灵敏度、特异性、准确度及重复性分析。PCR和多重实时荧光PCR方法检测7种食品类别的15种人工污染食品基质,验证多重实时荧光PCR方法在食品检测致泻大肠埃希氏菌的可行性。多重实时荧光PCR方法的灵敏度为100%,uidA特异性为97.1%,准确度为99.5%,eae特异性为94.8%,准确度为95.2%,其余12个目标基因的特异性、准确度均100%,两种检测方法的结果判定一致。多重实时荧光PCR方法在检测范围内各浓度水平上变异系数均小于2%,线性关系良好。结果表明,建立的多重实时荧光PCR方法能够灵敏、特异、准确、高效地定性检测食品中致泻大肠埃希氏菌。

主 题 词：致泻大肠埃希氏菌(DEC) 多重实时荧光PCR 方法建立 方法验证 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100403[100403] 10[医学] 

馆 藏 号：203125407...