急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌实时荧光RPA快速检测方法的建立

作     者：田飞焱 孟霞 裴建明 黄海莉 徐节华 顾泽茂 王淑兵 吴葵 TIAN Feiyan;MENG Xia;PEI Jianming;HUANG Haili;XU Jiehua;GU Zemao;WANG Shubing;WU Kui

作者机构：江西省农业技术推广中心江西南昌330046 华中农业大学水产学院湖北武汉430070 南昌市疾病预防控制中心江西南昌330038 南昌市新建区动物疫病预防控制中心江西南昌330100 

基　　金：江西省重点研发计划项目(20202BBG73031) 江西省农牧渔业科研指导性课题项目[赣农厅办函(2021)36号-序号29] 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2024年第54卷第1期

页      码：63-69页

摘      要：为建立一种简单、快速的急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)检测方法,本研究根据pirB基因保守序列设计了多组引物和exo探针组合,经过筛选优化,建立了VpAHPND实时荧光RPA检测方法。结果显示,该方法在42℃恒温反应15 min即可快速、特异性地检测出急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND),与其他虾类病原和养殖环境中的致病菌不发生交叉反应,最低菌体细胞检出浓度为3.8×10^(2)CFU/mL,质粒检测限为1.17×10^(1)copies/μL,且具有良好的重复性。利用本研究建立的实时荧光RPA方法与WOAH推荐的实时荧光qPCR方法对50份人工感染的南美白对虾样品进行检测,二者检测结果一致。结果表明,本研究建立的检测方法操作简单,反应灵敏,仪器依赖性低,结果可靠,适用于实验室和现场对VpAHPND快速检测。

主 题 词：急性肝胰腺坏死病 副溶血弧菌 重组酶聚合酶等温扩增技术 快速检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2024.0004

馆 藏 号：203125408...