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地骨皮的多重位点特异性PCR鉴别

地骨皮的多重位点特异性PCR鉴别

作     者:石旸 胡力 赵玉洋 蒋超 金艳 穆婧 袁媛 SHI Yang;HU Li;ZHAO Yuyang;JIANG Chao;JIN Yan;MU Jing;YUAN Yuan

作者机构:中国中医科学院中药资源中心北京100700 

基  金:国家科技部科技基础资源调查专项(2018FY100800) 中国中医科学院科技创新工程项目(C12021A041,C12021B014) 国家中医药管理局青年岐黄学者项目 

出 版 物:《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期:2024年第30卷第4期

页      码:35-41页

摘      要:目的:使用多重位点特异性聚合酶链式反应(PCR)的方法,简单高效地鉴定地骨皮(Lycii Cortex)的2种基原植物枸杞(Lycium chinense)和宁夏枸杞(***)。方法:在使用植物叶绿体基因组数据库(CGIR)获取枸杞和宁夏枸杞叶绿体基因组序列的基础上,利用IdenDSS软件筛选出两基原间特定的单核苷酸多态性(SNP)位点,并利用Primer 5.0软件设计获得特异性鉴别引物,包括鉴别枸杞的引物GQ-F/R、鉴别宁夏枸杞的引物NX-F/R。对引物浓度比、退火温度、循环次数、Taq酶进行优化,形成最适的PCR鉴别体系和条件,并对采集自不同地区的地骨皮进行适用性考察。结果:对影响PCR结果的各个条件进行考察优化后,最终确定枸杞和宁夏枸杞的引物浓度比为2∶1、退火温度为59℃、循环次数为30次时,来自不同产区地骨皮的2个基原枸杞和宁夏枸杞分别在183、295 bp的位置出现特异性鉴别条带。结论:通过一次PCR即可方便、快捷、高效地鉴定地骨皮的基原,为枸杞和宁夏枸杞的专属性鉴别提供新方法,同时对含有地骨皮成分的经典名方的研发提供一定的技术支撑。

主 题 词:地骨皮 枸杞 宁夏枸杞 分子鉴定 聚合酶链式反应 

学科分类:1008[医学-中药学类] 100504[100504] 1006[医学-中西医结合类] 1005[医学-中医学类] 1001[医学-基础医学] 100501[100501] 100601[100601] 100502[100502] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13422/j.cnki.syfjx.20230816

馆 藏 号:203125413...

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