人外周血淋巴细胞亚群表面多重蛋白定量方法

作     者：徐晓雪 田师宇 韦皓洁 户乃丽 邹林樾 孔璐 XU Xiao-xue;TIAN Shi-yu;WEI Hao-jie;HU Nai-li;ZOU Lin-yue;KONG Lu

作者机构：首都医科大学中心实验室北京100069 首都医科大学附属北京友谊医院北京100050 河南科技大学临床医学院、河南科技大学第一附属医院检验科洛阳471003 首都医科大学基础医学院北京100069 

基　　金：国家自然科学基金(81672834、81772557、82170525)资助项目 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2023年第43卷第12期

页      码：153-159页

摘      要：随着流式细胞检测技术的发展,仪器检测灵敏度、精度与稳定性不断提升。藻红蛋白(phycoerythrin,PE)荧光标记蛋白的定量检测结果已得到普遍认可。越来越多的研究提示测定样品单细胞表面蛋白的定量有明确临床意义,流式蛋白定量检测的需求正在增加,但是常用的BD QuantibriteTMBeads PE荧光定量方法局限于PE定量标准品,仅能使用PE荧光抗体,无法适应目前多色流式检测的需要。介绍了在多色流式检测中使用系列抗体定量捕获微球QuantumTMSimply Cellular?微球(QSC微球)进行单细胞表面多重蛋白定量的方法。QSC微球最初设计用于细胞表面蛋白定量,但因为其定量结果不稳定且与经典方法差距巨大,无法实际应用。通过比对多种实验条件探索解释并克服QSC微球蛋白定量技术的缺陷。介绍了改进后的多色流式细胞表面蛋白定量方法并展示了新方法获得的人淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD25、CD27、CD28、CD45RA、CD127和CD197蛋白的定量数据,尽管这一技术还有待优化,但其应用前景广阔,可以使多色流式获得跨平台可比较的单细胞多重蛋白表达数据,可以为单细胞多组学研究提供蛋白质指标间的量化关系数据,并且可用于自动荧光补偿计算、荧光溢漏扩散计算、抗体质量监测、多色荧光方案设计等。

主 题 词：流式细胞术 荧光补偿 单细胞分析 荧光定量 淋巴细胞 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071009[071009] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13523/j.cb.2310066

馆 藏 号：203125428...