香加皮与五加皮、地骨皮的PCR-RFLP鉴别

作     者：刁晓微 刘亚男 金艳 蒋超 赵玉洋 袁媛 DIAO Xiaowei;LIU Yanan;JIN Yan;JIANG Chao;ZHAO Yuyang;YUAN Yuan

作者机构：安徽中医药大学药学院合肥230012 中国中医科学院中药资源中心北京100700 

基　　金：国家科技性基础资源调查项目(2018FY100800) 中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目(C12021A041,CI2021B014) 青年岐黄学者项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ZZXT202217) 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2024年第30卷第4期

页      码：42-47页

摘      要：目的:建立聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法快速鉴别香加皮与其混淆品五加皮、地骨皮,避免因基原混乱影响用药安全。方法:从CGIR数据库获取的香加皮DSS标记序列,对香加皮DSS序列进行酶切位点分析,筛选香加皮与五加皮、地骨皮间差异位点,选择香加皮的特异性酶切位点Cla I,设计PCR-RFLP反应引物,对影响PCR-RFLP反应的退火温度、循环数、Taq酶、不同型号PCR仪、酶切时间等条件进行考察。利用建立的PCR-RFLP鉴别方法对不同产地香加皮与五加皮、地骨皮进行适用性考察。结果:在退火温度59℃、循环数为40个时,香加皮与五加皮、地骨皮样品经过特异性引物进行PCR扩增后,可出现清晰明亮的片段,酶切时间30 min,香加皮药材及其基原物种均可产生约140 bp和290 bp的目的片段,而2种混淆品五加皮和地骨皮药材及其基原物种只在250~500 bp有一条约430 bp的目的片段。该方法能对香加皮及其混淆品五加皮、地骨皮进行准确鉴别。结论:建立了香加皮与五加皮、地骨皮的PCR-RFLP鉴别方法,稳定性好、灵敏度高、适用性好,为香加皮与五加皮、地骨皮的质量控制提供参考。

主 题 词：香加皮 五加皮 地骨皮 聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性 分子鉴定 

学科分类：1008[医学-中药学类] 100504[100504] 1006[医学-中西医结合类] 1005[医学-中医学类] 1001[医学-基础医学] 100501[100501] 100601[100601] 100502[100502] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13422/j.cnki.syfjx.20231716

馆 藏 号：203125431...