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兔泰泽病原体实时荧光PCR检测方法的建立

兔泰泽病原体实时荧光PCR检测方法的建立

作     者:董浩 李楠 许中衎 邢壮壮 王学文 刘铭赫 李林姣 范学政 马丽颖 DONG Hao;LI Nan;XU Zhongkan;XING Zhuangzhuang;WANG Xuewen;LIU Minghe;LI Linjiao;FAN Xuezheng;MA Liying

作者机构:中国食品药品检定研究院北京102629 中国兽医药品监察所北京100081 

出 版 物:《实验动物科学》 (Laboratory Animal Science)

年 卷 期:2023年第40卷第6期

页      码:53-58页

摘      要:目的 建立一种适用于兔泰泽病原体检测的实时荧光PCR检测方法。方法 根据泰泽病原体的16S rRNA序列设计了特异性的引物和探针,对引物和探针浓度进行了优化,并评价其敏感性、特异性和重复性。同时,使用该方法对临床样品进行了检测,并与已报道的套式PCR方法进行比较。结果 建立了能够特异检测泰泽病原体的实时荧光PCR检测方法,该方法检测质粒标准品的最低检测限为8 copies/μL,不与SPF级实验动物必须排除的多种细菌发生交叉反应,批内和批间重复变异系数均小于3%,重复性良好。对70份临床样品的检测结果显示该方法的阳性样品检出率高于套式PCR检测方法。结论 建立的实时荧光PCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,适用于兔粪球样本中泰泽病原体的检测。

主 题 词:泰泽病原体  实时荧光PCR 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1006-6179.2023.06.010

馆 藏 号:203125446...

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