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基于特异性引物高效构建TALE文库

基于特异性引物高效构建TALE文库

作     者:蔡思杰 张书衍 王晓微 郭显阳 詹硕 CAI Sijie;ZHANG Shuyan;WANG Xiaowei;GUO Xianyang;ZHAN Shuo

作者机构:沈阳大学生命科学与工程学院辽宁沈阳110044 沈阳双鼎制药有限公司辽宁沈阳110179 

基  金:国家级大学生创新创业训练计划平台-创新训练项目(202211035010X) 

出 版 物:《高校化学工程学报》 (Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities)

年 卷 期:2023年第37卷第6期

页      码:943-950页

摘      要:人工构建的转录激活因子样效应物(TALE)已广泛应用于基因转录调控和基因组编辑领域,针对TALE构建过程非常复杂,研发了一种构建TALE文库的新方法。首先,基于金门酶切连接方法,设计3种用于识别碱基G的TALE骨架质粒;其次,使用4种特异性引物扩增3种骨架质粒得到质粒突变体;最后,使用金门酶切连接方法连接3种质粒突变体,成功构建最终的TALE文库。基因测序结果表明该文库包含所有可能确定TALE-DNA结合特异性的核苷酸组。由于TALE的高靶向性和多功能性,该TALE文库将广泛用于生命科学领域。

主 题 词:TALE文库 基因转录调控 基因组编辑 特异性引物 金门酶切连接方法 

学科分类:08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1003-9015.2023.06.009

馆 藏 号:203125461...

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