10-23型脱氧核酶对mRNA表达的双重抑制作用

作     者：王全会 左刚 施水兰 赵增强 崔玉芳 毛建平 WANG Quan-Hui;ZUO Gang;SHI Shui-Lan;ZHAO Zeng-Qiang;CUI Yu-Fang;MAO Jian-Ping

作者机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室北京100850 解放军476医院免疫学研究室福州350002 

基　　金：国家自然科学基金(30271546) 北京市自然科学基金(5033020)资助项目 

出 版 物：《军事医学科学院院刊》 (Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences)

年 卷 期：2005年第29卷第6期

页      码：531-534,579页

摘      要：目的:10-23型脱氧核酶是脱氧核糖核酸酶中的一种,能主动在RNA分子嘌呤-嘧啶结合点切割所有RNA分子,通过比较反义寡核苷酸的作用,初步研究10-23型脱氧核酶对基因表达抑制作用的发生机制。方法:采用体外转录GFP mRNA与脱氧核酶反应,以及GFP表达质粒与脱氧核酶共转染HeLa细胞,观察脱氧核酶对GFP的抑制作用。结果:体外和胞内实验均显示据靶点设计的10-23型脱氧核酶对绿色荧光蛋白mRNA具有切割作用。当10-23型脱氧核酶的两翼结合臂各具有连续8碱基互补而处在两翼结合臂和酶解核心连接处的2碱基错配时,尽管不能切割mRNA但是在胞内仍然有表达抑制作用;而当两翼结合臂具有4互补碱基紧接1错配碱基和4互补碱基时,10-23型脱氧核酶体外和胞内均丧失作用。结论:10-23型脱氧核酶对基因较强的表达抑制作用来自结合臂的反义寡核苷酸依赖的RNase H降解,和本身对mRNA直接切割作用的叠加,即10-23型脱氧核酶在细胞内具有对基因识别切割和诱导RNase H进行再切割的双重作用。

主 题 词：mRNA 10—23型脱氧核酶 反义寡核苷酸 基因表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-9960.2005.06.010

馆 藏 号：203125468...