成人源性甲状腺类器官的构建、鉴定及体外培养方案的优化

作     者：盛琪轩 李蕾 李伟 张伟 王强 查斯洛 马冠君 徐昕昀 单成祥 SHENG Qixuan;LI Lei;LI Wei;ZHANG Wei;WANG Qiang;ZHA Siluo;MA Guanjun;XU Xinyun;SHAN Chengxiang

作者机构：海军军医大学(第二军医大学)第二附属医院甲乳疝外科上海200003 

出 版 物：《海军军医大学学报》 (Academic Journal of Naval Medical University)

年 卷 期：2024年第45卷第1期

页      码：49-56页

摘      要：目的构建成人源性甲状腺类器官模型,并优化其体外培养方案。方法选取成人甲状腺乳头状癌(PTC)患者癌旁正常甲状腺组织,经消化、分离得到甲状腺细胞,以基质胶包埋细胞,设计不同甲状腺类器官条件培养基进行培养,在显微镜下观察第1代和第2代类器官形成效率和出芽情况。采用H-E染色观察类器官模型的组织学形态,免疫组织化学染色检测类器官模型中甲状腺特异性标志物NK2同源框蛋白1(NKX2.1)、配对盒基因8(PAX8)和甲状腺球蛋白(TG)表达情况,评估类器官模型与正常甲状腺组织的一致性。采用ELISA法检测类器官模型上清液中甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)水平,验证其是否具有激素分泌功能。结果从7例PTC患者的手术标本中成功建立了8例甲状腺类器官模型。在甲状腺类器官培养体系中,提高Noggin和表皮生长因子浓度及联用多种小分子抑制剂后,第1代和第2代类器官模型出芽更多、球体更大,类器官形成效率更高。H-E染色结果显示,甲状腺类器官模型中可见大量由单层立方上皮细胞围成的滤泡结构,与人体甲状腺组织结构特征相似。免疫组织化学染色结果显示,类器官模型中甲状腺标志物NKX2.1、PAX8和TG阳性,与来源组织生物标志物特征一致。ELISA检测结果显示,类器官模型上清液中可见T3、T4分泌,表明其具有甲状腺激素分泌能力。结论采用成人甲状腺组织构建的类器官模型稳定,为甲状腺功能减退症的再生医学治疗提供了新的方向。

主 题 词：类器官 模型 甲状腺 培养 甲状腺功能减退症 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16781/j.CN31-2187/R.20230119

馆 藏 号：203125513...