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利用接头插入技术构建环型T载体(pYCQ1)

利用接头插入技术构建环型T载体(pYCQ1)

作     者:杨成泉 马春泉 杨达梅 蒋丹 李海英 YANG Cheng-quan;MA Chun-quan;YANG Da-mei;JIANG Dan;LI Hai-ying

作者机构:黑龙江大学生命科学学院分子生物学重点实验室哈尔滨150080 

基  金:国家自然科学基金资助项目(30871566) 黑龙江省自然科学基金资助项目(C2007-37) 黑龙江大学青年基金资助项目 黑龙江大学学生科技创新项目 

出 版 物:《黑龙江大学自然科学学报》 (Journal of Natural Science of Heilongjiang University)

年 卷 期:2010年第27卷第1期

页      码:117-120页

摘      要:人工设计接头序列,其特点为含有3′突出A末端,同时人工接头序列内部含有XcmⅠ、BspM901、AceⅡ酶切位点。利用人工接头3′突出A与线性的pMD18-T载体的3′突出T连接,将线性的pMD18-T载体改造成环形具有自身复制功能的pYCQ1载体,降低了实验室使用T载体的成本,同时增加了载体的克隆位点。利用pYCQ1作为T载体时,用XcmⅠ酶切(XcmⅠ限制性片段具有3′T末端)pYCQ1载体可以得到线性的3′T粘性末端的pYCQ1-T载体。实验验证,pYCQ1-T载体可以在受体菌***5α中进行大量自我复制,并能够克隆1 800 bp的外源PCR产物。

主 题 词:接头 XcmⅠ pMD18-T载体 pYCQ1载体 pYCQ1-T载体 

学科分类:09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1001-7011.2010.01.026

馆 藏 号:203125617...

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