重组人血管内皮抑素的阳离子交换色谱复性与纯化条件研究

作     者：陈涛 储平 戴清源 李婉珍 李朝军 

作者机构：安徽工程科技学院生物化学工程系安徽芜湖241000 南京大学生命科学院江苏南京210008 南京师范大学生命科学院江苏分子医学重点实验室江苏南京210097 

基　　金：安徽省教育厅项目资助(KJ2009B147) 江苏省博士后科研基金资助(0602025B) 

出 版 物：《药物生物技术》 (Pharmaceutical Biotechnology)

年 卷 期：2010年第17卷第2期

页      码：117-120页

摘      要：对rhEndostatin包涵体蛋白的色谱复性条件进行研究,摸索出最佳的复性、纯化条件,解决其在大肠杆菌中表达提取时遇到的蛋白变性问题。按实验条件对表达的rhEndostatin包涵体蛋白进行提取、洗涤、变性;利用正交法设计重组蛋白的色谱复性、纯化实验;利用SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换柱对rhEndostatin包涵体蛋白进行了色谱复性、纯化。最佳复性条件为rhEndostatin上样浓度为2.5 mg/mL,洗脱体积流量为1/20床体积/min(3.5 mL/min),NaCl浓度0.1 mol/L,GSH/GSSG的浓度比为3/0.3 mmol/L。在此条件下纯度约97%,蛋白回收率为90%,重组蛋白的活性最高,IC50达到5μg/mL。

主 题 词：重组人血管内皮抑素 色谱复性 阳离子交换色谱 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1007[医学-药学类] 071010[071010] 081704[081704] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 0836[0836] 

D　O　I：10.19526/j.cnki.1005-8915.2010.02.005

馆 藏 号：203125621...