以HA2为基础的流感病毒候选疫苗同时与H5N1、H1N1和H3N2亚型毒株产生交叉反应

作     者：魏美丽 陈燕霞 王宇 徐俊 熊为亮 姜世勃 潘春根 WEI Mei-li;CHEN Yan-xia;WANG Yu;XU Jun;XIONG Wei-liang;JIANG Shi-bo;PAN Chun-gen

作者机构：中山大学中山医学院人类病毒学研究所//教育部热带病防治研究重点实验室广东广州510080 中山大学药学院药物分子设计研究中心广东广州510006 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 

基　　金：Introduction of Innovative R&D Team Program of Guangdong Province(2009010058 to CP) Chinese Ministry of Science&Technology,Hong Kong,Macao,Taiwan Collaborative Program(201200007673 to SJ) 

出 版 物：《中山大学学报（医学科学版）》 (Journal of Sun Yat-Sen University:Medical Sciences)

年 卷 期：2014年第35卷第3期

页      码：321-328页

摘      要：【目的】探讨以流感病毒(IAV)血凝素蛋白茎部(HA2)保守表位为免疫原来诱导针对不同血清型流感病毒的广谱体液免疫应答。【方法】我们构建了一个重组的IAV疫苗IR30-Fd,由A/Viet Nam/1203/2004(H5N1)病毒株HA2的30个保守的氨基酸残基(IR30)和一个连在碳端的三聚体基序(foldon,Fd)组成。原核表达该蛋白,圆二色谱和Western Blot验证IR-30-Fd的室间结构之后,分别免疫BALB/c小鼠和新西兰白兔,并同时免疫IR30多肽为对照,制备血清抗体。然后应用ELISA和Western Blot方法检测抗体的滴度,应用细胞ELISA和Western Blot方法检测抗体与不同的IAV菌株HA2蛋白的交叉反应性。【结果】IR30-Fd能够形成具有α螺旋的三聚体空间结构。用IR30-Fd和IR30免疫BALB/c小鼠和新西兰白兔后获得了高效价的抗IR30的特异性抗体。鼠抗IR30-Fd抗体能与H3N2和H1N1的HA蛋白反应而鼠抗IR30抗体不能。鼠抗IR30-Fd抗体稀释6 400倍、兔抗IR30-Fd抗体稀释8.2×105倍均可以与H5N1的HA蛋白反应。细胞ELISA表明兔抗IR30-Fd抗体与天然状态下的H5N1和H3N2的HA蛋白的结合亲和力高于兔抗IR30抗体。【结论】本研究结果表明IR30-Fd蛋白能够模拟H5N1 HA2蛋白保守序列的天然三聚体结构,并且能够诱导产生针对H5N1 H1N1和H3N2亚型HA蛋白的广谱交叉反应抗体,为研制通用的流感病毒疫苗提供了结构基础。

主 题 词：甲型流感病毒 通用疫苗 HA2 三聚体 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2014.0054

馆 藏 号：203125810...