病毒样颗粒为阳性对照的H5N1实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：张国广 郭迟鸣 欧阳莹 黄小君 陈亮 ZHANG Guo-guang;GUO Chi-ming;OUYANG Ying;HUANG Xiao-jun;CHEN Liang

作者机构：厦门大学生命科学学院福建厦门361102 闽南师范大学生物科学与技术学院福建漳州363000 

基　　金：福建省自然科学基金(2010J01240) 厦门市科技计划项目(3502Z20103007) 

出 版 物：《厦门大学学报（自然科学版）》 (Journal of Xiamen University：Natural Science)

年 卷 期：2014年第53卷第3期

页      码：418-423页

摘      要：合适的标准品对实时荧光定量PCR(qPCR)检测高致病性H5N1禽流感病毒(avain influenza virus,AIV)十分重要.本研究将H5N1AIV HA基因的部分序列插入到能够表达MS2噬菌体病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)DNA序列的表达载体上,诱导表达后得到了包裹有H5N1AIV HA基因RNA片段的VLP.该VLP能够耐受核酶的消化,形态与MS2噬菌体病毒颗粒形态相同.利用表达的VLP作为阳性标准品及设计的特异性荧光探针、淬灭链,使用优化的qPCR反应体系,得到qPCR检测H5N1亚型AIV的阳性对照标准曲线.研究结果为高致病性H5N1亚型AIV的准确定量检测提供了基础.

主 题 词：H5N1亚型禽流感病毒 qPCR 病毒样颗粒 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090602[090602] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.6043/j.issn.0438-0479.2014.03.024

馆 藏 号：203125811...