猪Linda病毒巢式RT-PCR检测方法的建立

作     者：于浩洋 王彩霞 仇松寅 刘晓飞 景宏丽 吴绍强 冯春燕 林祥梅 Yu Haoyang;Wang Caixia;Qiu Songyin;Liu Xiaofei;Jing Hongli;Wu Shaoqiang;Feng Chunyan;Lin Xiangmei

作者机构：中国检验检疫科学研究院动物检验与检疫研究所北京100176 三亚中国检科院生物安全中心海南三亚572000 

基　　金：“十四五”国家重点研发计划项目(2022YFD1800500) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2024年第41卷第1期

页      码：95-101页

摘      要：猪Linda病毒能引起仔猪先天性震颤,严重危害养猪业的发展,目前在我国暂未发现感染病例。本研究根据猪Linda病毒Core-E~(ms)基因序列,设计并合成巢式RT-PCR引物,通过对退火温度、引物浓度等进行优化,建立了猪Linda病毒巢式RT-PCR检测方法。结果显示,该方法具有良好的特异性,与非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型均无交叉反应;敏感性好,对慢病毒阳性对照品的最低检出限为10~1 copies/μL,比普通RT-PCR灵敏10倍。使用该方法检测模拟病毒样品,发现最低检出限为10~1 TU/mL,与荧光定量RT-PCR方法一致。本研究首次建立了可检测猪Linda病毒的巢式RT-PCR方法,其特异性强、灵敏度高,为在口岸以及条件有限的场地对猪Linda病毒进行精准且快速的检测提供了有效技术手段,也为防范Linda病毒传入提供了有力技术支撑。

主 题 词：猪Linda病毒 巢式RT-PCR 检测方法 非典型瘟病毒 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2024.01.017

馆 藏 号：203125839...