忍冬VIGS基因沉默体系构建

作     者：褚洪月 刘振华 李佳 张永清 蒲高斌 CHU Hongyue;LIU Zhenhua;LI Jia;ZHANG Yongqing;PU Gaobin

作者机构：山东中医药大学山东济南250355 山东省中药质量控制与全产业链建设协同创新中心山东济南250355 

基　　金：山东省重点研发计划(乡村振兴科技创新提振行动计划)项目(2022TZXD0036) 山东省农业良种工程项目(2021LZGC008) 山东省现代农业产业技术体系中草药创新团队项目(SDAIT-20) 

出 版 物：《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期：2024年第55卷第4期

页      码：1309-1315页

摘      要：目的以忍冬Lonicera japonica八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因为标记基因,利用ZMBJCMV载体建立基于病毒诱导的忍冬基因沉默体系。方法以忍冬为材料,通过选取同源性较高的片段设计PDS基因的特异性引物,克隆出片段长度为135 bp的序列作为目的基因片段,经双酶切后与黄瓜花叶病毒载体连接构建VIGS重组载体,转化根癌农杆菌后,侵染忍冬幼苗。此外,还对农杆菌吸光度(A)值和侵染方法对PDS基因沉默效率的影响进行了比较。结果被侵染植株叶片PDS基因表达水平显著降低,叶绿素和类胡萝卜素含量显著下降,叶片出现白化表型。结论建立了以ZMBJ-CMV载体诱导的忍冬基因沉默体系,农杆菌A值为0.8、注射后再进行真空浸润,能够提高忍冬目标基因的沉默效率,为开展忍冬关键基因的功能研究提供了技术支撑。

主 题 词：忍冬 LjPDS VIGS 叶绿素 类胡萝卜素 沉默体系 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.7501/j.issn.0253-2670.2024.04.023

馆 藏 号：203126024...